【方法】利用亮發(fā)光桿菌富集培養(yǎng)基分離喜樹種子內(nèi)生放線菌，并根據(jù)菌落形態(tài)及 16S rRNA 基因序列同源性分析進行菌種鑒定；以及利用與病原微生物共培養(yǎng)方法檢測分離菌株的抗菌活性。

【結果】從上海交通大學校園的喜樹種子中共分離到 33株內(nèi)生疑似放線菌，經(jīng)基于 16S rRNA基因序列分析的分子鑒定，確定其中 21 株屬于鏈霉菌，1 株屬于擬諾卡氏菌，另有 3 株由于序列相似性低于 95%而無法分類；8 株因未能克隆 16S rRNA 基因序列而未確定分類。這 11 株疑似內(nèi)生放線菌是否是新放線菌(種)類群，有待后續(xù)深入研究。初步的抗細菌、真菌活性檢測發(fā)現(xiàn)，分離到的內(nèi)生放線菌中 42.42%以上對立枯絲核菌(Rhizoctonia solani Kühn)有很強的抑制菌核形成的作用，54.54%內(nèi)生菌有較強抑制芽孢桿菌生長的作用。并且挑選其中具有代表性的菌株 Streptomyces sp. CXSZ1 進行代謝產(chǎn)物的分析，初步發(fā)現(xiàn)其代謝產(chǎn)物中含有抗細菌活性成分。

【結論】喜樹種子內(nèi)生放線菌的分離、鑒定及生物活性物質(zhì)分離鑒定的研究工作，一方面可以為揭示喜樹等高等植物種子內(nèi)生菌的起源、演化等提供有價值的信息，同時也為新結構、新活性化合物發(fā)掘提供實驗材料。

植物內(nèi)生菌長期生活于某種植物內(nèi)部，因其*的生存環(huán)境，可能進化出與宿主植物類似的代謝途徑與產(chǎn)物。近年來，植物內(nèi)生菌作為一種新的微生物資源，而成為天然產(chǎn)物發(fā)掘的熱點，并成功篩選到了紫杉醇、鬼臼毒素、長春堿等化合物產(chǎn)生菌。獲得特定生物活性物質(zhì)產(chǎn)生菌，不僅為環(huán)保、可持續(xù)天然產(chǎn)物，及實現(xiàn)規(guī)?；峁┝擞欣麠l件；同時，也為復雜天然產(chǎn)物生物合成途徑理論研究提供了更好的實驗材料。

喜樹為我國*珙桐科高大喬木，其次生代謝產(chǎn)物中的喜樹堿(Camptothecin，CPT)通過作用于拓撲異構酶 I (Topo I)，而誘導細胞凋亡。喜樹堿及其衍生物已被廣泛應用于肝癌、胃癌、膀胱癌及白血病等的臨床治療。迄今對于喜樹內(nèi)生菌的研究主要集中在內(nèi)生亮發(fā)光桿菌，并且已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了能夠產(chǎn)喜樹堿的內(nèi)生真菌；對喜樹的根、莖、葉等器官中的內(nèi)生放線菌已有研究，但對喜樹種子內(nèi)生放線菌的研究尚未見報道。
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亮發(fā)光桿菌