原代細胞的實驗要點：
1、本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2、所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3、蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4、如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5、如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
原代細胞的注意事項：
1、收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。
2、先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置數(shù)小時，穩(wěn)定細胞狀態(tài)，切忌在溫箱內(nèi)靜置過夜。
3、靜置后鏡檢，拍照，記錄細胞狀態(tài)。建議傳代后也拍照記錄細胞生長情況。
4、貼壁細胞：若細胞密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，收集細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基，留8ml繼續(xù)培養(yǎng)至80%左右再傳代，瓶蓋可稍微擰松。
5、細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基含血清和雙抗，可收集后4℃保存?zhèn)溆茫裳a加2%血清。剛開始傳代時建議一半用細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基，一半用客戶自備的培養(yǎng)基，使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件，以免因不適應(yīng)而造成生長狀態(tài)不佳。
6、細胞胰酶消化液建議使用PBS配制，細胞運輸和保存：
可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存方式：干冰運輸，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇；收到后應(yīng)繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。
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